摘 要：重点关注了荧光假单胞菌的专利技术现状，介绍了荧光假单胞菌的防治谱、使用方式以及通过遗传改造提高其效果的方法，以供参考。
关键词：荧光假单胞菌; 生物防治; 农药
荧光假单胞菌( Pseudomonas fluorescens)是一类革兰氏阴性杆状细菌，具有分布广、繁殖快、数量多、营养需要简单、竞争定殖力强、可产生多种抗生素的特点[1]。对植物病害，尤其是土传病害如猝倒病、根腐病、枯萎病、小麦全蚀病[2]等都具有较好的防治效果，是一种重要的有益微生物资源。
1 荧光假单胞菌作为生防菌的使用方式
不同于一般的化学农药，荧光假单胞菌是有生命的。这使荧光假单胞菌能够持续发挥作用，但也给其应用带来了困难。分析已有的专利申请可知，荧光假单胞菌的使用方式随着时间的推移也有所变化。
1. 1 使用发酵产物 生防菌剂制备的一般步骤为：将分离、筛选、纯化的菌株在培养基平板上培养，挑选菌株制成悬浮液，将悬浮液接种于发酵培养基中发酵培养，得到发酵制品。
1.2 制备剂型 随着生物农药的发展，生防菌的生产朝着制剂化、产业化、规模化、商业化发展，然而由于生防菌的有效成分为生物活体，其对外界环境如温度、湿度、光照等较为敏感，且其药效发挥缓慢，产品的'储存条件苛刻，货架寿命不足，难以稳定，生防菌的加工比化学杀虫剂更为复杂。专利CN103609556A公开了一种微生物松脂基植物油悬浮剂，是以微生物、溶剂、增稠剂、乳化剂为原料，首先将微生物、增稠剂经过预处理，然后将全部原料混合在一起搅拌，最后投入砂磨机中砂磨至粒径为5 um以下，最后过滤即可。
1.3 分离有效成分 荧光假单胞菌有效代谢产物如2,4-DAPG分离纯化的常规步骤为菌种发酵液离心或过滤得发酵液，通过常规萃取、浓缩、层析等常规技术分离纯化而得。专利CN102787090A公开了利用光假单胞菌MJM-5制备ACC脱氨酶、吲哚乙酸和嗜铁素的方法。
1.4 与其他药剂复配 专利CN201310632894A公开了荧光假单胞菌可以和抗生素类杀虫剂复配使用，制成新型杀菌杀虫复合生物制剂，实现一次施药，病虫兼治。专利CN102125060A公开了一种木霉菌、荧光假单胞杆菌水分散粒剂;CN101974451A公开了抗菌蛋白PopW与生防菌的混合生防制剂PopW-PF1。
1.5 遗传改造 专利CN103805550A公开了荧光假单胞菌CB113 QS系统comQ基因缺失突变菌株M2，与野生型菌株相比显著提高对玉米大斑病菌和人参锈腐病菌的抑制活性。类似地， CN1058230A公开了利用转座子Tn5诱变技术对荧光假单胞菌进行遗传改良，得到一株纯的基因工程细菌荧光93;WO2013076687A3公开了一株重组菌，其是荧光假单胞菌，在其基因组中含有nif基因，能够进行固氮作用，从而实现作物增产的目的。
2 荧光假单胞菌作为生防菌的作用
2.1 防治真菌病害表专利CN103146609A公开了一株荧光假单胞菌RP15，该菌株制成的菌剂可以防治辣椒疫霉病的发生。CN102286416A公开了荧光假单胞菌菌株YP1防治小麦全蚀病。
2.2 防治细菌病害 专利CN102154157涉及荧光假单胞菌菌株4AT8，由该菌发酵制备的菌剂对茄科作物青枯病、溃疡病、瓜果类细菌性角斑病、水稻白叶枯等细菌性病害的田间防效在60%～75%;同时，该菌剂还有改善土壤微环境等作用。
2.3 防虫 专利WO2012065038A2公开了假单胞菌属物种悬浮液或得自所述悬浮液的化合物和组合物能够防治沼蛤属物种、特别是金贻贝。CN101619292A公开了荧光假单胞菌 3026，该菌株广泛应用在防治棉铃虫、红蜘蛛和蝗虫等虫害的生物防治领域。
2.4 防治病毒病 专利CN102113521公开了由荧光假单胞菌CZ培养液制成的制剂，该制剂能够用于治疗植物病毒，还能够对操纵工具上的病毒进行消杀，促进作物的生长。
2.5 促进作物生长 专利CN103146610A涉及一株荧光假单胞菌，该发明针对花生具有良好的促进生长效果，菌株高效的解磷作用促进花生的生长发育和对磷肥的利用率。类似的还有WO2011078783A1。
3 问题与展望
荧光假单胞菌在应用上仍有许多问题：起效慢，活体难以保存。另外荧光假单胞菌被引入土壤后对环境有多大的影响，目前尚无定论。虽然存在以上问题，但是作为一种常用的生防菌，荧光假单胞菌本身也具有诸多优势。相信随着人们知识的不断积累，研究手段的不断改进，目前制约人们利用这些菌的因素将得到解决，荧光假单胞菌将在农药市场上占有重要地位。
参考文献
[1] 张伟琼. 荧光假单胞菌生防机理的研究进展. 生物学杂志，2007，24(3)：9-11.
[2] 岳东霞. 荧光假单胞菌工程菌株的构建及对黄瓜枯萎病的防治效果. 华北农学报，2008，23(6)：101-104.
